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5-26高效液相色譜(HPLC)作為現(xiàn)代分析化學(xué)的"金標(biāo)準(zhǔn)"技術(shù),其性能直接決定分析結(jié)果的可靠性和實驗室檢測效率。系統(tǒng)性能檢測應(yīng)從關(guān)鍵性能參數(shù)、日常操作維護(hù)和長期穩(wěn)定性三個維度展開,建立全面的質(zhì)量保障體系。一、關(guān)鍵性能參數(shù)檢測標(biāo)準(zhǔn)1.理論塔板數(shù)(N):通過標(biāo)準(zhǔn)品測試,要求N≥2000/米...
高效液相色譜系統(tǒng)是應(yīng)用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的儀器設(shè)備。由以下幾個部分構(gòu)成:高效液相色譜系統(tǒng)主要有分析型、制備型和專用型三類。一般由五個部分組成:高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)1、高壓輸液系統(tǒng):一般由貯液裝置、高壓輸液泵、過濾器、脫氣裝置等組成。①、貯液器:貯液器用于存放溶劑。溶劑必須很純,貯液器材料要耐腐蝕,對溶劑呈惰性。貯液器應(yīng)配有溶劑過濾器,以防止流動相中的顆粒進(jìn)入泵內(nèi)。溶劑過濾器一般...
紫外檢測器(UV),是基于溶質(zhì)分子吸收紫外光的原理設(shè)計的檢測器。因為大部分常見有機(jī)物質(zhì)和部分無機(jī)物質(zhì)都具有紫外吸收性質(zhì),所以該檢測器是液相色譜中應(yīng)用較廣泛的檢測器。紫外檢測器的工作原理是Lambert-Beer定律,即當(dāng)一束單色光透過流動池時,若流動相不吸收光,則吸收度A與吸光組分的濃度C和流動池的光徑長度L成正比。紫外檢測器有較好的選擇性和較高的靈敏度,而且對環(huán)境溫度、流動相組成變化和流速波動不太敏感,因此既可用于等度洗脫,也可用于梯度洗脫。除有具有較好的選擇性和較高的靈敏...
高效液相色譜是將氣相色譜與經(jīng)典液相色譜相結(jié)合發(fā)展起來的新型的分離、分析技術(shù)。具有分離技術(shù)效能高、檢測靈敏度高、分析速度快等優(yōu)點。它在醫(yī)藥、環(huán)境保護(hù)、食品工業(yè)、農(nóng)業(yè)、石化等領(lǐng)域獲得廣泛的應(yīng)用。高效液相色譜儀是利用混合物中各組份在不同的兩相中溶解,分配,吸附等作用性能的差異,當(dāng)兩相作相對運動時,使各組分在兩相中反復(fù)多次受到上述各作用力而達(dá)到相互分離,從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測方法結(jié)合,實現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測。兩相中有一相是固定的,叫做固定相,即色譜...
在高效液相色譜使用過程中,經(jīng)常會遇到一些操作及維護(hù)問題,為使HPLC系統(tǒng)良好運行,其中一個很重要的事情就是保持系統(tǒng)的清潔。因此,應(yīng)關(guān)注流動相流經(jīng)該系統(tǒng)的所有地方,對于這些地方經(jīng)常性的沖洗。1、流動相儲液瓶首先要經(jīng)常清洗流動相儲液瓶,或者每做一批新樣品更換一次流動相。一個臟的儲液瓶將會污染注入的流動相。建議儲液瓶中緩沖液使用時間不要超過一周,而有機(jī)溶劑使用時間不要超過一個月。也有人建議儲液瓶中保持用溶劑充滿,直到更換分析方法儲液瓶需更換新溶劑(流動相組成發(fā)生變化)時,將舊溶劑倒...
液相色譜儀檢測器根據(jù)適用范圍可以分為:專用型檢測器和通用型檢測器。專用型檢測器用以測量被分離試樣樣品組分某種特性的變化,專用型檢測器對樣品中組分的某種化學(xué)或物理性質(zhì)特別敏感,而這一性質(zhì)也是流動相所不具備的或至少在操作條件下不能顯示出來的。專用型檢測器靈敏度高,受外界環(huán)境影響和操作條件變化小,并且可用于色譜儀的梯度洗脫操作。但總體性能與通用型檢測器相比,其應(yīng)用范圍會受到一定的限制。通用型檢測器可連續(xù)測量色譜柱的流出物包括流動相和試樣樣品組分的全部特性變化,通常一般會采用差分測量...
高效液相色譜儀是應(yīng)用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的儀器設(shè)備。它是由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。目前可廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、食品科學(xué)、藥物研究以及環(huán)境研究中。下面我們就來了解一下高效液相色譜儀的操作方法!高效液相色譜儀的操作步驟:1、過濾流動相,根據(jù)需要選擇不同的濾膜(0.45um)。2、對抽濾后的流動相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。3、打開HPLC工作站,連接好流動相管道,連接檢測系統(tǒng)。4、進(jìn)入HP...
與傳統(tǒng)的高效液相色譜(HPLC)相比,超高效液相色譜(ultra-performanceliquidchromatography,UPLC)具有高分離度(ultraresolution)、高速度(ultraspeed)、高靈敏度(sensitivity)等優(yōu)勢。在全面提升HPLC的速度、靈敏度和分離度諸品質(zhì)的同時,保留其原有的實用性及原理。優(yōu)勢有:(1)通過小粒徑色譜柱(UPLC色譜柱通常采用1.7μm粒徑填料,HPLC色譜柱通常采用5.0μm粒徑填料)增加單位長度內(nèi)的理論塔...
國產(chǎn)液相色譜儀是近年來發(fā)展起來的一種具有高靈敏度、高選擇性的快速分離分析技術(shù)。它既能用于微量組分的分析測定,又能用于大量的制備分離,靈活多樣,其應(yīng)用范圍已超過其他各種分離方法,尤其在中藥樣品的分析分離方面更充分發(fā)揮它的特長,為推動該領(lǐng)域的進(jìn)步和發(fā)展作出了巨大貢獻(xiàn)。國產(chǎn)液相色譜儀通常都被認(rèn)為和大容量色譜柱和高流速有關(guān)聯(lián)的。然而并不是以設(shè)備的大小和系統(tǒng)消耗的流動相的多少來決定制備液相色譜,而是依據(jù)分離目的來決定。分析液相的目的是給一種組份進(jìn)行定量和定性。制備液相的目的是對產(chǎn)品的單...
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