液相色譜配件無顏色可能原因:
1、試劑孵育的時間沒有按說明書操作,解決方法:確定生物素抗體,連接的HRP試劑或鏈霉親和素-HRP使用的時間是否適當(dāng);
2、不同試劑盒或不同批號的試劑混用, 解決方法:重新檢查試劑的標(biāo)簽,確準(zhǔn)所有組份都屬于正使用的試劑盒中的。不能混用不同試劑盒或不同批號的試劑;
3、漏加酶或顯色劑, 解決方法:檢查操作流程,注意不要漏加;
4、HRP酶污染了疊氮鈉,解決方法:使用新配制的試劑,禁含疊氮鈉;
5、標(biāo)準(zhǔn)品有問題(若在標(biāo)本孔中有信號) 解決方法:按說明書檢查標(biāo)準(zhǔn)品的制備使用新標(biāo)準(zhǔn)品;
6、某一容器未洗凈,殘留滅火酶物質(zhì),解決方法:盡可能用試劑盒內(nèi)容器,另覓一定要潔凈、可靠;
7、使用含血清的緩沖液配制/復(fù)溶抗體,解決方法:重新確認所選用的試劑;
8、試劑配制/使用有誤,解決方法:將實驗重做;嚴格按說明書操作,每次配制和使用前看清標(biāo)簽。
9、緩沖液污染,解決方法:配制新新鮮的緩沖液;
液相色譜配件優(yōu)點:
1、精密度:ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時考察線性范圍。
2、安全性:指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。
3、經(jīng)濟性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進步降低成本而市場價格比較合理。
4、特異性:指試劑正確檢定不存在的被檢物質(zhì)的能力(無假陽性),取決于包被抗原(體)及標(biāo)記抗原(體)的純度及特異性。
5、穩(wěn)定性:試劑在規(guī)定條件下能儲存的時間,一般采用破壞性試驗即將試劑存放于37℃保存,定期測定其靈敏度,特異性和精密度等指 標(biāo),直到其質(zhì)量指標(biāo)開始下降為止,通常認為37℃每穩(wěn)定一天相當(dāng)于4-10℃保存一個半月。
6、靈敏度:有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的zui低量的能力;2)為試劑對人群或大量樣品中陽性檢出的能力(假陰性越少越好) ,取決于包被物的全面性。
7、簡便性:指在不影響試劑的前三項指標(biāo)的前題下,實驗和測定步驟越少越好,在定性試驗中結(jié)果判斷簡單明了,)定量試驗結(jié)果計算也 應(yīng)簡單。